對于陰離子色譜,通用有三種清洗方式,分別用于清洗酸溶性、堿溶性或有機(jī)污染物,在清洗過程中必須要確保嚴(yán)格按照清洗過程進(jìn)行,否則會引起色譜柱的局部高壓而損壞色譜柱。對于有機(jī)溶劑清洗色譜柱,需要逐步減少有機(jī)溶劑的量以避免由于混和而造成的流動相粘度的變化。
(1)選擇合適的清洗溶劑
a.對低價親水污染物:用10倍的淋洗液;
b.對高價親水污染物:用1到3M的鹽酸作淋洗液;
c.對金屬污染物:會引起色譜峰不對稱性,如鐵離子會引起硫酸根和磷酸根的拖尾,鋁會引起磷酸根回收率降低,可采用絡(luò)合劑酸類,如0.2M 草酸;
d.有機(jī)污染物:有機(jī)污染物會引起色譜柱效降低,可以采用兼容的有機(jī)溶劑清洗,有時也可以采用高濃度的鹽酸與有機(jī)溶劑混合清洗則更為有效,如200mM鹽酸和80%乙腈,但要注意這種溶液要混合立即使用,長時間混合會造成酸的分解并且損壞色譜柱。要特別注意色譜柱有機(jī)兼容性,如果該色譜柱只能對15%的有機(jī)溶劑兼容,這時有機(jī)溶劑濃度就不能超過15%。
(2)清洗過程
a.配制500mL合適的清洗溶液;
b.斷開抑制器中,分別清洗保護(hù)柱和分離柱,如果分離柱和保護(hù)柱串聯(lián)清洗,則將保護(hù)柱接在分離柱之后;
c.設(shè)置流速對2mm色譜柱采用0.5mL/min,而對4mm色譜柱采用1mL/min;
d.用二次去離子水沖洗色譜柱15分鐘;
e.用清洗液清洗色譜柱60分鐘;
f.用二次去離子水沖洗色譜柱15分鐘;
g.連接抑制器,用淋洗液平衡色譜柱。
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